ICS65.020.30 CCS B41 0865 新疆维吾尔自治区地方标准 DB65/T4590--2022 重大动物疫病监测样品采集，送检技术规范 Technical specifications for sample collection and inspection in surveillance of major animal epidemics 地方标准信息服务平台 2022－10－10发布 2022-12-09实施 新疆维吾尔自治区市场监督管理局 发布 地方标准信息服务平台 DB65/T4590-2022 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由新疆维吾尔自治区动物疾病预防控制中心提出。 本文件由新疆维吾尔自治区畜牧兽医局归口并组织实施。 本文件起草单位：新疆维吾尔自治区动物疾病预防控制中心。 本文件主要起草人：任娟、刘亚涛、惠志华、王文、李舵、薛文、秦菊、李彦芳、符玉涓、李琴、 杨倩、孙倩、陆桂丽、邓强、苏晓慧、努尔麦麦提·阿穆提、居马别克。夏拉巴依、乌那尔汗。吉斯汗、 马晓艳、陈卫东、美热木古丽。巴依待拉提、沙娜瓦尔·塔希、阿依江。卡那提拜克、玛依拉·艾尼瓦、 丁剑。 本文件实施应用中的疑问，请咨询新疆维吾尔自治区动物疾病预防控制中心。 对本文件的修改意见和建议，请反馈至新疆维吾尔自治区畜牧兽医局（乌鲁木齐市天山区新华南路 408号）、新疆维吾尔自治区动物疾病预防控制中心（新疆乌鲁木齐市高新技术产业开发区蓝天路268 号）、新疆维吾尔自治区市场监督管理局（新疆乌鲁木齐市天山区新华南路167号）。 新疆维吾尔自治区牧兽医局联系电话：0991-8568089；传真：0991-8527722；邮编：830004 新疆维吾尔自治区动物疾病预防控制中心联系电话：0991-4626082；传真：0991-4641491；邮 编：830011 新疆维吾尔自治区市场监督管理局联系电话：0991-2818750；传真：0991-2311250；邮编： 830004 地方标准信息服务平台 I 地方标准信息服务平台 DB 65/T 4590--2022 量大动物疫病监测样品来集：送检技术规范 本文件规定了重大动物疫病监测样品的采样原则、采样前准备和样品采集、送检、保存与包装。 本文件适用于各级动物疫病预防控制机构及相关单位重大动物疫病监测样品采集工作。 2规范性引用文件 下列文件中的内容道过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T18935口蹄疫诊断技术 NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 NY/T561动物炭疽诊断技术 、二、三类动物疫病病种名录农业部公告第1125号 中华人民共和国动物防疫法中华人民共和国主席令第六十九号 病原微生物实验室生物安全管理条例国务院令第424号，2018修订版 兽医实验室生物安全技术管理规范农业部公告第302号 高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范农业部公告第503号 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 监 surveillance 长期地、连续地收集、核对、分析疾病的动态分布和影响因素的资料，并将信息及时上报和反馈， 以便及时采取干预措施。 你准不 3. 2 采集collection 3.3 溶血hemoiysis 由于红细胞被破坏，胞内血红蛋白等物质进入血清。 3.4 样品sample 取自动物或环境，拟通过检测反映动物个体、群体或环境有关状况的材料或物品。 3.5 动物瘦病animalepidemic 动物传染病、寄生虫病。 1 DB 65/T4590—2022 3. 6 人畜共患病zoonosis 由同-一种病原体引起，流行病学上相互关联，在人类和动物之间自然传播的疫病。 3. 7 重大动物疫情majoranimalpandemic 高致病性禽流感等发病率或者死亡率高的动物疫病突然发生，迅速传播，给养殖业生产安全造成严 重威胁、危害，以及可能对公众身体健康与生命安全造成危害的情形，包括特别重大动物疫情。 3.8 重大动物疫病范畴categoriesofmajoranimaldiseases 《一、二、三类动物疫病病种名录》规定的非洲猪瘟、高致病性禽流感、蹄疫、小反兽疫、非 洲马瘟等一类动物疫病；布鲁氏菌病、棘球蜘病、狂犬病、炭疽、牛结核病、马传染性贫血、牛结节性 皮肤病等二类动物疫病；我国尚未发现的及我国已消灭的动物疫病。 3. 9 0-P 液 oesophageal-pharyngeal fluids 食道-咽部分泌物 4采样原则 4.1先排除炭疽后采样 凡发现动物患病后表现为体温迅速升高、全身肌肉痉挛、天然孔流出黑红色的煤焦油状血液、凝血 不全、可视粘膜发或者表面有针尖状出血点、突然死亡、尸僵不全症状，怀疑患有炭疽时，不应解剖。 需解剖采样，应按照NY/T561的规定，采集血液标本，进行细菌学检查，确定不是炭疽后方可解剖采样。 4.2适时采样 根据动物的实际情况和实验目的，选择适当的采样时机。对疫苗免疫动物进行抗体监测，免疫后2 周～3周采血。采集死亡动物的病料，应在动物死亡后2h内采集，无法完成时，夏天不超过6h，冬天不 超过24h。监测病原或需要分离病原时，应在发热期或症状明显期采样。 4.3科学采样 结合当地的地理条件和养殖情况，根据动物的饲养密度、年龄、品种、交通条件等因素，选择具有 代表性的采样地点，合理布局。 4.4典型采样 选取未经药物治疗、症状明显的动物，在病变明显的部位采样，采样部位不应用消毒剂处理。 4.5无菌采样 无菌采样前，采样工具、容器需进行无菌处理，防止外源性污染和样品交义污染。尸体剖检前需采 集样品的，应先采样后剖检，避免人为污染样品。 4.6足量采样 4.6.1样品数量 2 DB65/T4590-2022 采集足够数量的样品，根据监测的疫病种类侧重采样，在不能确定是何种疫病的情况下，应全面采 样。 4.6.2备份棒品 每份样品的体积应满足所有检测项目的需要，并有剩余样品。疑似阳性动物的样本应平行采集2份， 一份送检，一份留样备检。 4.7少应激和伤害 活体动物采样时，应考虑动物福利，避免过度刺激或伤害动物。 4.8生物安全防护 采样人员加强个人防护，使用合格的医用防护用品（防护服、口罩、帽子、手套、鞋套等），避免 感染人畜共患病。做好环境消毒和病死动物、病料和污染物的无害化处理，避免污染环境，防止传播疫 病。 5荐前备 5.1聚样人贸 5.1.1采样人员经生物安全知识培训，熟悉样品采集方法，熟练掌握样品采集操作技术。 5.1.2采样人员做好生物安全防护，需佩戴防护口罩、护目镜、连体防护服、双层乳胶手套、防水靴 套，防止感染人畜共患病和污染环境，造成动物疫病扩散。 5.2器具和容器 5.2.1保温箱、探杯、开口器、采样枪、解剖刀、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、棉签、注射器及针 头。 5.2.2样品容器：离心管、封口袋、带螺帽的塑料离心管，盛放同批样品的容器类型、大小须统一。 5.2.3试管架、铝饭盒、无菌聚丙烯纤维头塑料杆拭子或棉拭子、封口膜、封条、冰袋 5.2.4.采样刀剪等器具和样品容器应洁净、干燥，并提前消毒。刀、剪、镊子应经103kPa高压蒸汽 灭菌或者煮沸消毒30min，使用前用酒精擦或者进行火焰灭菌处理。器皿（玻制、陶制等）应经103 kPa高压蒸汽灭菌或者160℃干烤2h灭菌。 5.2.5器具和容器使用后先消毒后清洗。 5.3保存液 根据监测目的和样品的种类准备保存试剂，并提前分装好。0.01mo1/L或0.04m mol/L磷酸盐缓冲 液（PBS，ph7.4）、30%或50%甘油磷酸盐保存液（用于病毒检测时，应加入双抗）、0-P液保存液配置 方法见附录A。 6样品采集 6.1样品种类 3